实验报告

AB-PAS染色实验报告

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一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称	厂家	型号
脱水机	常州市中威电子仪器有限公司	TSJ-SD
包埋机	常州市中威电子仪器有限公司	BMJ-A
病理切片机	赛默飞世尔科技有限公司	SHANDON FINESSE 325
冻台	武汉俊杰电子有限公司	JB-L5
组织摊片机	常州市中威电子仪器有限公司	PHY-III
防脱载玻片	湖北百奥斯生物科技有限公司	BP0510
正置显微镜	奥林巴斯有限公司	CX-31
成像系统	日本滨松光子学株式会社	NanoZoomer®S360

2、主要试剂及货号

名称	厂家	型号
无水乙醇	国药集团化学试剂有限公司	100092683
环保透明剂	同声科技
环保封片剂	同声科技
AB-PAS染色试剂盒	湖北百奥斯生物科技有限公司

二、实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水：依次于环保脱蜡剂(1)、环保脱蜡剂(2)、环保脱蜡剂(3)中分别脱蜡10分钟，然后经无水乙醇、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇各5分钟。蒸馏水洗3次。

2、爱先蓝染液（pH2.5）染10-20分钟，稍水洗。

3、高碘酸溶液氧化10分钟。

4、蒸馏水充分洗涤2分钟。

5、雪夫试剂染色10-15分钟。

6、流动自来水洗5分钟。

7、Mayer苏木素染核1-2分钟。

8、流水冲洗5分钟。

9、95%乙醇、无水乙醇脱水，环保透明剂透明，环保封片剂封固。

10、显微镜下镜检，图像采集分析。

三、结果判读

酸性粘液物质呈蓝色，中性粘液物质呈红色，混合粘液物质呈紫红色，细胞核呈浅蓝色。

四、注意事项

1、雪夫试剂临用前半小时取出恢复室温，溶液出现淡红色时不能使用。

2、雪夫试剂染色的时间随室温而定，夏季室温高，作用10分钟已足够；冬季室温低，可延长至20分钟左右。

3、雪夫试剂染色后，一定需要自来水冲洗。

4、此法糖原（稳定性糖原）也呈红色，但由于形态和分布都与粘液物质有所不同，因此较容易区分。

5、苏木素复染细胞核时应淡染，这样可与爱先蓝区分，也可省略不染。

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