实验报告

抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色实验报告

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一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称	厂家	型号
脱水机	常州市中威电子仪器有限公司	TSJ-SD
包埋机	常州市中威电子仪器有限公司	BMJ-A
病理切片机	赛默飞世尔科技有限公司	SHANDON FINESSE 325
冻台	武汉俊杰电子有限公司	JB-L5
组织摊片机	常州市中威电子仪器有限公司	PHY-III
防脱载玻片	湖北百奥斯生物科技有限公司	BP0510
正置显微镜	奥林巴斯有限公司	CX-31
成像系统	日本滨松光子学株式会社	NanoZoomer®S360

2、主要试剂及货号

名称	厂家	型号
无水乙醇	国药集团化学试剂有限公司	100092683
环保透明剂	同声科技
环保封片剂	同声科技
TRAP染色试剂盒	湖北百奥斯生物科技有限公司

二、实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水：依次于环保脱蜡剂(1)、环保脱蜡剂(2)、环保脱蜡剂(3)中分别脱蜡10分钟，然后经无水乙醇、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇各5分钟。蒸馏水洗3次。

2、TRAP工作液的配制：将TRAP染液B、A、Sodium tartate soln等比例混合，混匀，现配现用。

3、孵育染色：将切片用组化笔画圈后放在（加有一定量防止切片蒸干的纯水）湿盒中，蒸馏水清洗干净，滴加新鲜配制的TRAP工作液，于37℃烘箱中孵育30分钟。倾去工作液，双蒸水洗1分钟。

4、滴加足量的AMPD-HCL(PH9.4)，孵育10分钟。

5、蒸馏水清洗干净。

6、甲基绿或苏木素复染核，蒸馏水洗，无水乙醇脱水，干燥，封片。

7、显微镜下镜检，图像采集分析。

三、结果判读

破骨细胞胞浆呈酒红色，核呈浅绿色或蓝色。

四、注意事项

1、工作液配制过程中需要充分溶解，现配现用。

2、染液应保存在-20℃，使用前先复常温。

3、TRAP染色也可与ALP染色进行双染。

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