实验报告

油红O染色实验报告

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一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称	厂家	型号
冰冻切片机	赛默飞世尔科技有限公司	HM525 NX U
超优刀片	湖北百奥斯生物科技有限公司	BP0630
防脱载玻片	湖北百奥斯生物科技有限公司	BP0510
高品质盖玻片	湖北百奥斯生物科技有限公司	BP0531
正置显微镜	奥林巴斯有限公司	CX-31
成像系统	日本滨松光子学株式会社	NanoZoomer®S360

2、主要试剂及货号

名称	厂家	型号
OCT包埋剂	日本樱花SAKURA
固定液	湖北百奥斯生物科技有限公司
油红O染色试剂盒	湖北百奥斯生物科技有限公司	BP0340
异丙醇（60%异丙醇为分化液）	湖北百奥斯生物科技有限公司
返蓝液	湖北百奥斯生物科技有限公司
专用封片剂	湖北百奥斯生物科技有限公司

二、实验步骤

1、冰冻切片，厚约6-10μm，蒸馏水稍洗。

2、将固定好的切片或细胞入60%异丙醇中漂洗20-30秒。

3、取油红O储备液6ml，加蒸馏水4ml，混合后静置10分钟，即可用来染色。油红O染色时间5-10分钟。

4、60%异丙醇稍洗去多余染液，蒸馏水洗。

5、Mayer苏木素浅染核1分钟。

6、1%盐酸水溶液稍分化。

7、水漂洗10分钟或于稀碳酸锂水溶液中促蓝，水洗，用滤纸将切片周围水分擦干。

8、专用封片剂进行封片。

9、显微镜下镜检，图像采集分析。

三、结果判读

中性脂肪呈深橙红色，细胞核呈蓝色。

四、注意事项

1、由于脂肪易溶于有机溶剂，所以显示脂肪一般不能像石蜡切片一样处理，而通过冰冻切片染色来显示。

2、脂肪染色的冰冻切片不可太薄，过薄的切片常会使脂质丢失。

3、Mayer苏木素复染时间不能过长。

4、染色结果不能长期保存，应尽快观察及拍照。

5、如封片后有气泡，不能按压玻片也不能强行扯下盖玻片，玻片可入蒸馏水中浸泡让盖玻片自行脱落，然后重新封片，以防脂滴移位。

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