该技术是由ABI研发的SNP分型技术,其技术原理如下:PCR反应时,加入一对两端有不同荧光标记的MGB特异探针来识别不同等位基因(allele1和allele2),5’端为报告荧光基团(reporter),3’端为淬灭荧光基团(quencher)。PCR过程中,两个探针能与正向引物和反向引物之间的互补序列特异退火结合。当探针以完整形式存在时,由于能量共振转移,荧光基团只发出微弱荧光。特异的探针与相应的等位基因结合后,DNA聚合酶发挥5’到3’外切酶活性,把报告荧光基团切割下来,脱离3’端淬灭荧光基团的淬灭作用(quench),从而发出荧光。两个探针的5’端标有不同的荧光(FAM或VIC),3’端标有MGB淬灭基团结合体。根据检测到的不同荧光,可以判断相应样本的SNP等位基因型。
DNA提取及质量检测-引物及探针设计-qPCR扩增-结果分析。
探针法原理及结果示意图
1、DNA样品:浓度≥50ng/μl、体积≥20μl的总DNA样品。
2、血液样品:请提供≥500μl抗凝血;采用标准的采样管,抗凝剂推荐使用EDTA。
3、组织样品:请提供足量的组织样品(≥300mg)。
4、细胞(≥106 )。
5、PCR产物:提供浓度≥20ng/μl、体积≥20μl(根据具体的实验位点而定)。
6、SNP位点信息:SNP位点的rs号;SNP位点上下游各200bp的确切序列及SNP位点的突变类。
货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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BFS-0070 | 测序SNPs分析 | 样本/位点 | ¥150.00 | 查看详情 |
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