破骨细胞是一种执行骨吸收功能的细胞,其清晰辨识对骨组织生理病理学研究及代谢性骨病的研究具有十分重要的意义。当机体内破骨细胞功能活跃时,胞质内产生大量的抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphase, TRAP)。因此,鉴定破骨细胞的TRAP染色技术在病理诊断中不可或缺。
TRAP作为破骨细胞的特异性标志酶,是鉴别破骨细胞的重要标志,TRAP染色显示破骨细胞胞质中TRAP的活性,是破骨细胞的特异性染色。
破骨细胞胞浆呈酒红色,核呈浅绿色或蓝色。
脱蜡至水-TRAP染色-AMPD-HCL作用-水洗-染核-脱水-封片-显微镜镜检。
1、提供固定合格的样本。组织离体后,选择合适的固定液立即固定,固定液的量建议大于组织体积的10-15倍,新鲜标本用合适的容器固定24-48h,大标本固定12h,再切开固定。标本常温(24℃左右)或冷藏(4℃)固定,切勿冷冻结冰,固定样本常温运输送样。
2、石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。
1、工作液配制过程中需充分溶解,现配现用。
2、染液应于-20℃保存,使用前先复常温。
3、TRAP染色也可与ALP染色进行双染。
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