Masson三色染色又称马松染色,是结缔组织染色中最经典的一种方法,也是显示组织纤维的主要方法之一,主要用于鉴别胶原纤维和肌纤维。
主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。
Masson三色染色由Mallory三色染色改造,利用两种或三种阴离子染料混合或一起先后作用完成染色,与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。小分子量易穿透 结构致密、渗透性低的组织;大分子量则只能进入结构疏松、渗透性高的组织。然后,亮绿或苯胺蓝的分子量都很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色。
试剂组成 主要成分
1、Weigert铁苏木素A液 苏木素
2、Weigert铁苏木素B液 三氯化铁
3、丽春红酸性品红染液 丽春红
4、磷钼酸溶液 磷钼酸
5、苯胺蓝染液 苯胺蓝
脱蜡至水-Bouin's固定液过夜-铁苏木素染色-丽春红酸性品红染色-磷钼酸处理-苯胺蓝复染-脱水封片-显微镜镜检。
1、提供固定合格的样本。组织离体后,选择合适的固定液立即固定,固定液的量建议大于组织体积的10-15倍,新鲜标本用合适的容器固定24-48h,大标本固定12h,再切开固定。标本常温(24℃左右)或冷藏(4℃)固定,切勿冷冻结冰,固定样本常温运输送样。
2、涂片和爬片必须充分固定,石蜡切片实验前需充分脱蜡。
1、若组织用甲醛液固定,可在切片脱蜡至水后再置于Bouin'固定液于37℃烘箱内补充固定1-2小时,或常温固定一夜,流水冲洗10分钟,务必将固定液冲洗干净再进行后续染色。
2、Weiger铁苏木素分A、B两液,应于临用前将两液等份混合使用,而不宜预先混合,否则容易氧化沉淀而逐渐失去染色力。
3、磷钼酸处理时应镜下控制,见肌纤维呈红色,胶原纤维呈淡红色即可。
4、部分组织95%酒精脱水容易造成脱色过度,应注意肉眼控制。
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