EMSA(Electrophoretic Mobility Shift Assay)凝胶迁移实验是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术。
EMSA研究顺式作用元件与对应转录因子的相互作用这个层次,核心功能是验证蛋白质与特定核酸序列的结合特性,从而间接推断已知蛋白质的靶序列或已知序列的结合蛋白分子。
EMSA技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理。当核转录因子与一条人工合成的特异的DNA或RNA结合后,其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA,从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。
1、前期确定实验方案,接收样本、3'末端Biotin标记的探针、抗体。
2、预实验确定蛋白表达以及探针标记。
3、正式实验,10-15个工作日内完成,根据蛋白表达丰度不同以及检测指标数量多少会相应变化。
4、出具实验报告,提供原始扫描图片。
EMSA图片
1、客户提供细胞样本:
(1)收集细胞沉淀,细胞数量大于1×107。
贴壁细胞:用细胞刮将细胞小心刮下来,将细胞悬液1000rpm,离心5分钟。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
悬浮细胞:细胞悬液1000rpm,离心5分钟。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
(2)每个实验组细胞数量保证大于106,根据检测指标难易、蛋白表达丰度不同以及检测指标数量多少,细胞要求数量会相应变化。
(3)干冰运输。
2、客户提供组织样本,新鲜组织:
(1)组织保存完好:保存于-80℃或者液氮。
(2)组织重量要求大于100mg,根据组织大小、检测指标难易、蛋白表达丰度不同以及检测指标数量多少,组织要求数量会相应变化。
(3)组织中血液残留少,应该剔除除目的组织以外的部分。
(4)组织样本需干冰运输。
货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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