细胞转染是将外源分子如DNA、RNA导入真核细胞的技术。它已成为一种研究基因表达调控,基因突变分析,蛋白质生产的常规方法,其应用范围越来越广。
瞬时转染,外源基因进入受体细胞后,存在于游离载体上,不整合在细胞的染色体上。此时,外源DNA仍然以附加的形式存在于细胞内,因此,mRNA或蛋白质产物必须在短时间(1-3天)内进行测定或分析,而且质粒的人工构想和拷贝数可能会导致特异性调控元件失活或具有特异功能。其优点是快捷、简单,易于对结果进行分析,因此成为启动子功能分析的首选方法。
稳定转染,外源DNA整合到宿主细胞的染色体上。由于外源基因被整合到细胞的染色体中,使得调控区能更精确的模拟正常功能,对随后的转录分析没有时间限制。缺点是需要进行药物筛选和细胞扩增,因此操作难度大,需要的周期较长。
转染的常见方法有:电击法、脂质体法、病毒介导法。
1、提前沟通实验方案。
2、接收样本。
3、实验室培养细胞。
4、细胞计数,接种细胞。
5、进行转染操作。
6、收集细胞进行检测。
1、客户提供细胞样本:
(1)传代培养的细胞,需告知细胞名称、培养条件等基本信息,无细胞名称的细胞将不提供冻存服务,无培养条件的细胞将无法提供及时的传代培养等操作。
(2)寄送冻存细胞需用充足干冰保存运输。
(3)寄送培养细胞需拧紧培养瓶(不透气瓶盖),封口膜封好,常温运输,严禁冰冻,长途运输需装满培养基。
(4)客户提供的细胞需保证细胞的生长状态,细胞状态以收到细胞后的观察状态为准。
2、客户提供实验中的相关试剂:
(1)提供试剂货号、保质期、保存条件等基本信息。
(2)配制好的试剂需提供名称、浓度、安全性等信息。
(3)不接收具传染性的样本、试剂药物等等;不接收有生物危害的样本;不接收有致病性的样本。
货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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