组织芯片免疫荧光IF双标

服务介绍：

免疫荧光技术（immunofluorescence technique）是在免疫学、生物化学与显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称为荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法，称为荧光抗原法。这两种方法总称为免疫荧光技术。但实际工作中荧光抗原技术应用很少，所以常将荧光抗体技术称为免疫荧光技术。

在一张切片上对两个抗原进行标记，即为免疫荧光IF双标，普通方法免疫荧光双标要求一抗来源不能相同，若是相同，二抗无法区分。不同的一抗对应标记不同颜色，可以用于定位两种不同的抗原。组织芯片免疫荧光可以将数十至上百个小组织整齐地排列在一张载玻片上进行染色，使芯片上的组织样本实验条件保持一致、节省时间、节省试剂，扫描后便于统一分析。相对单张染色时间和成本都可降低，缺点是选取的组织面积比较小，不能全面的体现个体样本的表达情况。组织芯片免疫荧光双标流程与常规组织免疫荧光双标流程基本一致，但样本比较珍贵，操作流程更加严格。

主要用途：

免疫荧光染色及成像分析是研究组织形态和组织原位抗原表达不可或缺的检测技术，广泛应用于临床病理和医学及生物学研究的各个领域。凡是可以作为抗原或半抗原的物质，如：蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、酶、激素、病原体及受体等，都可以在细胞、亚细胞水平检测到。

检测原理：

免疫荧光技术根据抗原抗体特异性结合的原理，先将已知抗体（或抗原）标记上荧光基团，再利用这种荧光抗体（或抗原）作为探针来检测固定细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。在荧光显微镜下观察，当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光照射后，会发射出一定波长的荧光，从而确定靶抗原（或抗体）的性质与定位，还可利用定量技术（如：流式细胞仪）测定含量。

实验流程：

脱蜡与水化-抗原修复-血清封闭-孵育一抗-孵育二抗-DAPI染核-封片-显微镜镜检。

样本要求及运输条件：

1、提供固定合格的样本。组织离体后，选择合适的固定液立即固定，固定液的量建议大于组织体积的10-15倍，新鲜标本用合适的容器固定24-48h，大标本固定12h，再切开固定。标本常温（24℃左右）或冷藏（4℃）固定，切勿冷冻结冰，固定样本常温运输送样。

2、涂片和爬片必须充分固定，石蜡切片实验前需充分脱蜡。

3、提供准确的抗体信息。

注意事项：

1、先做单个样本预实验，可以客户提供，也可以我司准备，按切片数量计费（费用同常规免疫荧光），以便确认抗体特异性以及最佳浓度。

2、抗体效果及浓度确认后，用预实验芯片染色（预实验芯片由客户提供），参考预实验普通切片的条件来进行免疫荧光染色。若客户没有，可以不做。

3、用正式实验芯片染色，预实验芯片确认效果后再做安排。

4、预实验普通切片、预实验芯片和正式实验芯片，最好是同一类型组织，即与客户提供正式实验芯片的组织类型一致。组织芯片建议扫描。

5、正式实验的趋势我司不做保证。